キャスト陣は、TVアニメ「ゲゲゲの鬼太郎」(第6期)で鬼太郎を演じた沢城みゆき、目玉おやじを演じた野沢雅⼦に加え、おなじみのあのキャラクターに似た謎の少年役として古川登志夫のほか、かつての目玉おやじを演じるのは「鬼滅の刃」で鬼舞辻無惨を演じ日本中を震えあがらせた関俊彦。

今回、初めて「ゲゲゲの鬼太郎」シリーズに参加する関は
「まさか、鬼太郎の父で参加することができるとは！この仕事をやっていて良かった」
とコメントを寄せている。

水木を演じるのは「テニスの王子様」シリーズの忍足侑士役の木内秀信。

関と同じく本シリーズ作品への参加は初めてとなるが
「水木しげる先生生誕100周年の記念に制作される映画だと知り、そのような大きな節目の作品に、大役を演じさせて頂くことに背筋が伸びる思い」
とコメントをしている。

さらに種﨑敦美、小林由美子、白鳥哲、飛田展男、中井和哉、沢海陽子、山路和弘、皆口裕子、釘宮理恵、石田彰、庄司宇芽香、松風雅也、といった、豪華声優陣が出演する。